背景:
       本方法非常适合对大量样品进行多个目的片段或者目的区域的DNA拷贝数检测研究。
技术特点：

天昊生物自主专利技术
◣多重检测可将12个片段融入1个检测体系，其中9个检测目的片段，3个参照基因片段。
◣最为准确的CNV拷贝数定量检测方法，平均检测误差<5%。
◣高灵敏度：可以准确定量高达6个拷贝的目的片段。
◣高通量：实验反应只需4个小时。
◣低成本：无需大量重复，多重实验大大节省了检测成本。
◣高灵活性：可根据不同检测需求进行设计合成Customer Design Panel及试剂盒，只需拥有荧光毛细管电泳仪就可以轻松实现高效的拷贝数多重检测。省去繁琐的国外定制流程，更快速、更便宜。

技术原理：

该专利技术原理说明见图1：取一定量的竞争DNA片段混合物----每个片段与各自对应基因片段仅有微小差别（通常为几个碱基长度差异），然后与合适量的样本DNA混合，作为随后多重荧光竞争性PCR扩增的模板；多重PCR产物经毛细管电泳后对不同基因位点扩增产物以及同一位点的不同模板（样本DNA与竞争DNA）扩增产物根据其长度差异进行分离；分析每个基因片段的S/I值，利用参照基因S/I值对目标基因S/I值进行校正后获取目标基因的准确拷贝数。 与其它拷贝数检测技术如qRT-PCR和MLPA相比，该检测专利技术具备低成本、高效率、高准确性的优势。PCR扩增产物用ABI3130XL进行毛细管电泳，原始数据文件采用GeneMapper4.0（Appliedbiosystems）进行目标峰高及峰面积数据读取，输出数据采用EXCEL进行处理分析。

        图1： AccuCopy^®多重CNV检测技术原理

       利用内对照DNA校正不同片段的扩增效率的差异，参照基因R来作为2拷贝的内参基因，用于拷贝数绝对定量。数据处理时，使用目的峰面积S/内对照DNA峰I，再用参照基因R进行标化2拷贝，目的基因片段的拷贝数便可以精确定量了。

       图2：AccuCopy^®在1个体系中进行10个目的片段多重定量检测的荧光毛细管电泳图。

     图3： 各种基因拷贝数检测技术的参数比较

技术效果：

 

发表文献:
       待加。